[发明专利]用于毒品检测的量子点荧光免疫层析试纸条及其制备方法

说明书

本发明公开了用于毒品检测的量子点荧光免疫层析试纸条，包括底衬，在底衬上粘贴有硝酸纤维素膜，硝酸纤维素膜外表面一侧粘设释放垫和样品垫，硝酸纤维素膜外表面另一侧粘设有吸水纸，硝酸纤维素膜设有靠近释放垫的检测区和靠近吸水纸的控制区，检测区包被BSA偶联毒品分子，控制区包被羊抗兔多克隆抗体。本发明还公开了用于毒品检测的量子点荧光免疫层析试纸条的制备方法，包括S1、量子点标记抗体和荧光结合垫制备；S2、BSA偶联毒品分子及羊抗兔多抗包被硝酸纤维素膜；S3、试剂条组装。本发明公开的用于毒品检测的量子点荧光免疫层析试纸条具有检测快速，操作方便，灵敏度高应用范围广的优点。

技术领域

本发明属于医学检验领域，涉及用于毒品检测的量子点荧光免疫层析试纸条及其制备方法。

背景技术

毒品检验是指应用化学、物理、生物以及现代仪器分析的原理和技术，对毒品的种类、组成和含量进行快速、准确鉴别与测定。常见的毒品检验的检材包括各种形态的毒品可疑物质以及生物检材，其中常见的检材有尿液、血液、唾液和毛发。

目前应用较为广泛的生物检材毒品检验分析方法有：胶体金免疫侧向层析法、酶联免疫法、气相色谱-质谱联用等。其中：胶体金免疫层析具有快速、简便等优点，但灵敏度较低，适合于毒品浓度较高的生物检材如尿液样本。酶联免疫法(ELISA)法虽然检测灵敏度优于胶体金免疫试纸条，但操作步骤繁琐，对实验环境、操作人员等条件要求高，无法随身携带应用于现场检测。气相/液相色谱-质谱联用方法虽然灵敏度高、特异性强，但仪器设备体积大、价格昂贵，对实验环境、操作人员等条件要求高，且单次检测时间长、费用高。

在传统快速免疫检测方法中，国内外主要采用的是胶体金标记、荧光微球标记、时间荧光分辨微球标记等方法的试纸条，这些试纸条都存在不同程度的缺陷，例如胶体金制备较难，颗粒直径较难控制均匀，稳定性较差，灵敏度低；荧光微球标记不均匀，检测结果重现性差；时间分辨荧光微球颗粒偏大导致荧光反应不充分，经常导致假阳结果出现。

量子点是在纳米尺度上的原子和分子的集合体，主要是由II-VI族和III-V族元素组成的均一或核壳结构纳米颗粒，是准零维的纳米材料，它具有以下优点：激发光谱宽而发射波长窄，可以使用小于其发射波长10nm的任意波长的激发光进行激发，从而避免相邻探测通道的串扰；不同粒径和组成的量子点其发射波长不同，可用于多标记检测；荧光效率高，荧光强度强，稳定性好，生物兼容性好，对生物大分子标本的活性无伤害，尤其是经过各种化学修饰之后可以进行特异性连接。因此，量子点优良的荧光性能使得它可以广泛应用于生物医学检测和诊断中。

发明内容

本发明的第一个目的在于提供一种用于毒品检测的量子点荧光免疫层析试纸条，其能发挥量子点荧光免疫层析检测技术快速，操作方便，灵敏度高的有点，避免现有检测技术的缺点和不足之处。本发明的第二个目的在于公开用于毒品检测的量子点荧光免疫层析试纸条的制备方法。

技术方案：用于毒品检测的量子点荧光免疫层析试纸条，包括底衬，在底衬上粘贴有硝酸纤维素膜，所述硝酸纤维素膜的外表面的一侧粘设释放垫和样品垫，所述硝酸纤维素膜的外表面的另一侧粘设有吸水纸，硝酸纤维素膜设有靠近释放垫的检测区和靠近吸水纸的控制区，检测区包被BSA偶联毒品分子，控制区包被羊抗兔多克隆抗体。

进一步地，释放垫喷涂量子点荧光颗粒标记的毒品检测鼠单克隆抗体。

用于毒品检测的量子点荧光免疫层析试纸条的制备方法，包括以下步骤：

S1、量子点标记抗体和荧光结合垫制备

(1)将100μl的浓度为10M羧基量子点加入到反应器中，补充400μl硼酸盐缓冲液，搅拌均匀后得到混合液，然后进入步骤(2)；

(2)向步骤(1)得到的混合液中分别加入20μl待标记的浓度为1mg/ml的毒品抗体分子，低速搅拌均匀后形成混合液，然后进入步骤(3)；