[发明专利]细胞外囊泡的固定和保留

说明书

本发明涉及一种固定细胞外囊泡的方法。该方法包括提供含有细胞外囊泡的样本，并使该样本与不可逆交联剂和任选的含醛固定剂接触。优选地，所述不可逆交联剂是1‑乙基‑3‑(3‑二甲基氨基丙基)碳二亚胺。所述方法还包括对固定的细胞外囊泡进行成像，以确定或排除临床样本中的疾病或病症。本发明还涉及一种用于固定生物样本中的细胞外囊泡的试剂盒。

本申请要求2017年7月27日提交的美国临时专利申请序列号62/537,541和2018年3月5日提交的美国临时专利申请序列号62/638,554的优先权权益，其全部内容通过引用并入本文。

本发明是在国家健康研究院授予的ULl TR000457-06的政府支持下完成的。政府对本发明享有一定权利。

技术领域

本发明涉及使用不可逆交联剂和任选地含醛固定剂固定细胞外囊泡的方法。该方法可用于细胞外囊泡的成像以及疾病的诊断或监测。

背景技术

癌症是死亡的主要原因(Torre et al.，A Global Cancer Incidence andMortality Rates and Trends-An Update,Cancer Epidemiol Biomarkers Prev.25:16-27(2016))，癌症的早期诊断及其适当的表征对于降低死亡率是必要的(McPhail et al.,Stage at Diagnosis and Early Mortality from Cancer in England,Br J CancerS108-115(2015))。男性中最常见的新癌症病例是前列腺癌(161,000人)、肺癌(116,900人)和结肠直肠癌(71,000人)。同前。对于女性而言，最常见的新癌症病例是乳腺癌(252,000人)、肺癌(105,510人)和结肠直肠癌(64,000人)。2017年，估计新的眼肿瘤病例是3,130，而估计死亡是330。同前。虽然眼内肿瘤的流行性显著低于其它癌症但研究眼组织和眼流体是使用眼作为模型系统用于开发对转移的结构介导体进行成像的技术的机会。

早期诊断对于降低死亡率是必需的，并且癌症诊断学的追求的是非侵入性筛选测试。对于大多数肿瘤，由于侵入性外科手术使患者遭受疼痛、增加成本和并发症的风险，组织活检面临挑战。此外，基于组织的肿瘤分布易于采样偏差，仅提供肿瘤异质性的快相，且不能重复获得。这种技术限制的解决方案是通过监测血液或其它生物流体中的预测性生物标志物并进行液体活检来监测癌症。检测和监测肿瘤的非侵入性方法的开发一直是癌症研究和肿瘤学中的主要挑战。该项目的目标是开发平台技术以使用液体活检(血液或其它生物流体)非侵入性地检测从癌症分泌的生物标志物，用于多种癌症的早期检测、监测或预测。