[发明专利]使用脂肪来源的干细胞治疗多发性硬化症

权利要求书

1.一种治疗原发性进展型多发性硬化症的方法，包括将非基因修饰的人脂肪来源干细胞(hADSC)给予对其有需要的受试者的中枢神经系统(CNS)中。

2.根据权利要求1所述的方法，其中，所述hADSC是通过以下获得自人皮下脂肪的hADSC：

(a)冷冻脂肪抽吸物；

(b)解冻所述脂肪抽吸物并用组织解离酶或通过机械破碎解离；

(c)通过离心粒化包含所述hADSC的细胞部分，并可选地用能够支持细胞活力的悬浮介质洗涤颗粒，并使悬浮液经受至少一次另外的离心；

(d)将步骤(c)中获得的颗粒重悬于能够支持细胞活力的悬浮介质中并从重悬的颗粒中的细胞群体中选择hADSC；

(e)可选地在hADSC选择之前进行至少一次过滤；和

(f)可选地将所述hADSC培养至少3代。

3.根据权利要求2所述的方法，其中，所述hADSC是通过以下获自人皮下脂肪的hADSC：(i)冷冻脂肪抽吸物；(ii)解冻所述脂肪抽吸物并使用组织解离酶或通过机械破碎解离；(iii)通过离心粒化包含所述hADSC的细胞部分；(iv)用等渗缓冲液或培养基洗涤颗粒并进行另外的离心；(v)将步骤(iv)中获得的所述颗粒重悬于等渗缓冲液或培养基中并至少进行一次过滤；(vi)从重悬的颗粒中的细胞群体中选择hADSC；以及(vii)将所述hADSC培养至少3代。

4.根据权利要求2或权利要求3所述的方法，其中，在离心后获得的包含所述hADSC的细胞部分不暴露于红细胞裂解缓冲液。

5.根据前述权利要求中任一项所述的方法，其中，所述hADSC通过粘附至细胞培养容器来选择。

6.一种将人脂肪来源干细胞(hADSC)注射到对其有需要的受试者的中枢神经系统(CNS)中的方法，所述方法包括通过以下从人皮下脂肪获得hADSC：

(a)冷冻脂肪抽吸物；

(b)解冻所述脂肪抽吸物并用组织解离酶或通过机械破碎解离；

(c)通过离心粒化包含所述hADSC的细胞部分，并可选地用能够支持细胞活力的悬浮介质洗涤颗粒，并使悬浮液经受至少一次另外的离心；

(d)将步骤(c)中获得的颗粒重悬于能够支持细胞活力的悬浮介质中并进行至少一次过滤；

(e)从重悬的颗粒中的细胞群体中选择所述hADSC；

(f)可选地将所述hADSC培养至少3代；和

(g)将所述hADSC注射到所述受试者的CNS中。

7.一种用于由人皮下脂肪获得人脂肪来源干细胞(hADSC)以给予至对其有需要的受试者的方法，所述方法由以下组成：

(a)冷冻脂肪抽吸物；

(b)解冻所述脂肪抽吸物并用组织解离酶或通过机械破碎解离；

(c)通过离心粒化包含所述hADSC的细胞部分，并可选地用能够支持细胞活力的悬浮介质洗涤颗粒，并使悬浮液经受至少一次另外的离心；

(d)将步骤(c)中获得的颗粒重悬于能够支持细胞活力的悬浮介质中并进行至少一次过滤；

(e)从重悬的颗粒中的细胞群体中选择hADSC；和

(f)可选地在将所述hADSC给予所述受试者之前，将其培养至少3代。

8.根据权利要求6或权利要求7所述的方法，其中，所述hADSC通过粘附至组织培养容器来选择。

9.根据权利要求6或权利要求7所述的方法，其中，所述受试者患有多发性硬化症(MS)。

10.根据权利要求9所述的方法，其中，所述多发性硬化是进展型MS。

11.根据权利要求10所述的方法，其中，所述进展型MS是继发性进展型MS。

12.根据权利要求10所述的方法，其中，所述进展型MS是原发性进展型MS。