[发明专利]快速检测出入境旅客携带物中违禁成分的试剂盒

权利要求书

1.一种快速检测出入境旅客携带物中违禁成分的试剂盒，其特征在于，所述快速检测出入境旅客携带物中违禁成分的试剂盒包括：样品处理体系、LAMP扩增反应体系、核酸免疫胶体金试纸条、阳性标准品、阴性标准品；所述样品处理体系包括核酸裂解液、Glass Milk、gDNA Binding Buffer、70%乙醇、无水乙醇；所述LAMP扩增反应体系包括待测样本DNA，牛、羊特异性的LAMP引物组，LAMP等温反应缓冲液，Bst DNA聚合酶；所述LAMP引物组包括：F3、B3组成的外引物对，FIP、BIP组成的内引物对，LF、LB组成的环引物对；所述LAMP引物组中的F3、B3组成的外引物对分别标记生物素和地高辛；所述阳性标准品为含有阳性DNA模板；所述阴性标准品为不含有核酸的无菌去离子水；所述核酸裂解液包括5%的Chelex-100，20g/L的蛋白酶K，二者以14：1的比例配制，现配现用。

2.根据权利要求1所述的快速检测出入境旅客携带物中违禁成分的试剂盒，其特征在于：所述阳性DNA模板包括山羊、绵羊、家牛、黄牛、牦牛的基因组DNA；所述阳性标准品制备方法如下：采集山羊、绵羊、家牛、黄牛、牦牛这几种易被感染疯牛病且可作为化妆品原料动物的组织，按照动物组织基因组DNA提取试剂盒操作提取基因组DNA，或者按照分子克隆的DNA提取方法，从组织样品中获得DNA，溶于TE溶液或无菌去离子水中保存备用。

3.根据权利要求1所述的快速检测出入境旅客携带物中违禁成分的试剂盒，其特征在于：所述F3、B3组成的外引物对，包括F3: SEQ ID NO1， B3: SEQ ID NO 2，F3的5’端用生物素标记，B3的5’端用地高辛标记；所述FIP、BIP组成的内引物对，包括FIP:SEQ ID NO 3，BIP:SEQ ID NO 4；所述LF、LB组成的环引物对，包括LF: SEQ ID NO 9, LB: SEQ ID NO10。

4.根据权利要求1所述的快速检测出入境旅客携带物中违禁成分的试剂盒，其特征在于：所述LAMP扩增反应体系优选为25μL的体系，体系为：1μL提取得到的DNA、12.5μL 2×等温反应缓冲液、1μL 5μM Primer F3、1μL 5μM Primer B3、2μL 20μM Primer FIP、2μL 20μMPrimer BIP、1μL Bst DNA聚合酶、4.5μL去离子水，共25μL；所述2×等温反应缓冲液为：40mM的三羟基甲基氨基甲烷盐酸盐（pH8.8）、20mM KCl、16mM MgSO₄、20mM (NH₄)₂SO₄、20%的Tween20、1.6M的甜菜碱、2.8mM dNTP。