[发明专利]一种用于甘蔗野生种染色体样品制备的材料培养方法

权利要求书

1.一种用于甘蔗野生种染色体样品制备的材料培养方法，其特征在于：包括以下步骤：

1)将甘蔗野生资源无性系材料从资源圃挖出，材料带分蘖芽点及部分老根，剪除材料的全部叶片；

2)在专用的盆栽培养盆的内胆内填装无杂质泥土至总容积1/3处，将样品植于内胆中并覆土至总体积1/2处，浇透水并覆盖透明塑料薄膜后置于30℃左右的温室内培养，让幼苗萌发；

3)材料长出8-12个分蘖、高度达75-85cm时，提起内胆连同泥土和材料植株完整从盆栽培养盆中取出；

4)在盆栽培养盆内填装1:3混合均匀的珍珠岩和晒干的草坪草，填装至花盆容积的1/3-1/2，通过内胆将取出带泥土的植株重新栽入盆栽培养盆后浇足水置于30℃左右的温室内培养；

5)培养15-20天后，在盆栽培养盆底部长出大量白色幼嫩根尖，提起内胆从内胆的底部采集样品；采集完成后在盆栽培养盆内填装1:1混合均匀的珍珠岩和晒干的草坪草重复培养。

2.如权利要求1所述的一种用于甘蔗野生种染色体样品制备的材料培养方法，其特征在于：所述步骤2)幼苗萌发后12-15天，幼苗长至14-16cm揭去塑料薄膜继续在30℃左右的温室培养30-35天，材料长出8-12个分蘖、高度达75-85cm。

3.如权利要求1所述的一种用于甘蔗野生种染色体样品制备的材料培养方法，其特征在于：所述盆栽培养盆内填装1:3混合均匀的珍珠岩和晒干的草坪草，珍珠岩为未使用的干净珍珠岩或蛭石，草坪草为修剪下来且重复晒干的禾本科草坪草。

4.如权利要求1所述的一种用于甘蔗野生种染色体样品制备的材料培养方法，其特征在于：所述步骤4)中，植株通过内胆重新栽入盆栽培养盆后培养过程中，表土稍有干燥需立刻浇水至盆底有少量水流出。

5.一种如权利要求1-4任意一项培养方法制备的野生甘蔗根尖体细胞染色体材料，采样处理后用于染色体计数、核型分析、基因组原位杂交(GISH)及荧光原位杂交(FISH)分析。

6.一种用于制备甘蔗野生种染色体样品材料盆栽培养盆，其特征在于：包括盆栽培养盆和内胆，盆栽培养盆为圆柱形盆体，下端安装底座并开设有通孔，并置于盆垫上，盆栽培养盆内放置内胆，所述内胆为直径比盆栽培养盆小1-2cm空心圆柱，底部安装十字形的支架和网格布，上端开口并安装以中心对称的把手；

所述盆栽培养盆和内胆内壁均设计有刻度线；

所述盆栽培养盆为陶盆，内胆为厚0.3-0.5cm的塑料做成。

7.一种权利要求6所述的盆栽培养盆在野生甘蔗根尖体细胞染色体材料的培养中的应用，包括：

将内胆置于盆栽培养盆内后，在内胆内填装1/3的无杂质泥土，将制备的样品植于泥土上并覆土至总体积1/2处，浇透水并覆盖透明塑料薄膜后置于30℃左右的温室内培养让幼苗萌发；

材料长出8-12个分蘖、高度达75-85cm时，通过内胆上的把手将内胆从盆栽培养盆中取出，同时内胆内的泥土和材料植株完整的保存；

在盆栽培养盆内填装1:3混合均匀的珍珠岩和晒干的草坪草，填装至花盆容积的1/3-1/2，将取出带泥土的植株的内胆重新栽入盆栽培养盆后浇足水置于30℃左右的温室内培养；

培养15-20天后，在盆栽培养盆底部长出大量白色幼嫩根尖，提起内胆可从内胆层的底部采集样品；采集完成后在盆栽培养盆内填装1:3混合均匀的珍珠岩和晒干的草坪草重复培养。