[发明专利]一种百合离体快速繁殖方法在审
| 申请号: | 201810772870.9 | 申请日: | 2018-07-14 |
| 公开(公告)号: | CN108834895A | 公开(公告)日: | 2018-11-20 |
| 发明(设计)人: | 黄霞 | 申请(专利权)人: | 沿河后花园农业观光旅游综合开发有限公司 |
| 主分类号: | A01H4/00 | 分类号: | A01H4/00 |
| 代理公司: | 北京科家知识产权代理事务所(普通合伙) 11427 | 代理人: | 陈娟 |
| 地址: | 550011 贵州省*** | 国省代码: | 贵州;52 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 百合 离体快速繁殖 外植体 茎尖 快速繁殖技术 培养基基质 再生 交叉污染 再生周期 组织培养 不定芽 诱导率 再生苗 光期 鳞片 腋芽 病毒 | ||
1.一种百合离体快速繁殖方法,其特征在于,包括如下步骤:选取优质、健康的百合植株,剪取百合植株茎尖作为外植体,再生培养,获得百合幼苗。
2.如权利要求1所述的百合离体快速繁殖方法,其特征在于,包括如下步骤:
(a)剪切百合植株茎尖:选取茎粗0.5~1cm且带腋芽的百合植株,剪切长度为2~8cm的百合植株茎尖作为外植体,剪切时,每段留1个节,节下留1~2cm,剪成斜口,斜面与水平面夹角为50±2°,消毒;
(b)诱导生长:将步骤(a)中得到的外植体的基部,在萘乙酸水溶液和/或吲哚丁酸水溶液中浸泡22~24h,平放在MS固体培养基上诱导不定芽丛的生长培养,获得带有不定芽丛的组织块;
(c)伸长培养:纵向分切组织块,置于芽伸长培养基上培养;
(d)生根培养:待步骤(c)中的组织块上的不定芽伸长至2~4cm时,切分,放入生根培养基中培养,获得百合幼苗。
3.如权利要求2所述的百合离体快速繁殖方法,其特征在于,所述的消毒是:除去百合茎部泥土和坏组织,用流动水冲洗除去外部污染物,剥除外层茎叶,置于酒精度为70%酒中浸泡5-10秒,用质量浓度为1.0%的次氯酸钠溶液,喷雾消毒10~20分钟,之后用无菌水冲洗3~5次,即可。
4.如权利要求2所述的百合离体快速繁殖方法,其特征在于,所述的步骤(b),萘乙酸水溶液和/或吲哚丁酸水溶液中,萘乙酸与吲哚丁酸在水溶液中的总质量浓度为10±1mg·L-1。
5.如权利要求2所述的百合离体快速繁殖方法,其特征在于,所述的步骤(b)中,所述MS固体培养基为MS+BA 2.0mg/L+NAA 1.0mg/L,pH 5.8,蔗糖30g/L,琼脂5g/L。
6.如权利要求2所述的百合离体快速繁殖方法,其特征在于,所述的诱导生长,在MS固体培养基上诱导不定芽丛的生长培养时,温度为15℃,光照:20光期/4暗期。
7.如权利要求2所述的百合离体快速繁殖方法,其特征在于,所述的芽伸长培养基为MS+BA0.5mg/L+NAA1.0mg/L,pH5.8,蔗糖30g/L,琼脂5g/L;
芽伸长培养的条件为:空气相对湿度70%以上,保持日温为15~23℃、保持夜温为8~15℃,光照:16光期/8暗期。
8.如权利要求2所述的百合离体快速繁殖方法,其特征在于,所述的生根培养基为:MS+NAA0.5mg/L+活性炭1.0g/L,pH 5.8,蔗糖30g/L,琼脂5g/L;
诱导生根培养的条件为:温度25℃,光照:12光期/12暗期。
9.如权利要求1-8任一项所述的方法在毛百合、卷丹百合、白百合、川百合、青岛百合的育苗中应用。
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