[发明专利]检测引发血流感染病原体的成套试剂和试剂盒有效

专利信息
申请号: 201810418108.0 申请日: 2018-05-04
公开(公告)号: CN108384782B 公开(公告)日: 2022-05-31
发明(设计)人: 刘鹏;姜永强;李倩;张彦;律清宇;江华;郑玉玲;赵尊全 申请(专利权)人: 中国人民解放军军事科学院军事医学研究院
主分类号: C12N15/11 分类号: C12N15/11;C12Q1/689;C12Q1/6869;C12Q1/14;C12Q1/04
代理公司: 北京纪凯知识产权代理有限公司 11245 代理人: 关畅;魏少伟
地址: 100850*** 国省代码: 北京;11
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摘要:
搜索关键词: 检测 引发 血流 感染 病原体 成套 试剂 试剂盒
【说明书】:

发明公开了检测引发血流感染病原体的成套试剂和试剂盒。本发明公开的成套试剂,由序列表中序列1‑38的38条单链DNA组成,该成套试剂的可以用于检测引发血流感染病原体、制备用于检测引发血流感染病原体的试剂盒、检测待测样本是否含有引发血流感染病原体和制备用于检测待测样本是否含有引发血流感染病原体的试剂盒。实验证明,本发明的成套试剂可同时检测金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌、肺炎克雷伯菌、单核细胞增生李斯特菌4种常见血流感染病原体,并且检测结果快速准确,具有很高的灵敏度和特异性,最低检测限可达到101数量级CFU/ml。

技术领域

本发明涉及生物技术领域中,检测引发血流感染病原体的成套试剂和试剂盒。

背景技术

血流感染(bloodstream infection,BSI),是临床上重症感染性疾病之一,根据症状不同可分为败血症、脓毒症和脓毒性休克,具有较高的发病率和致死率,其常见感染源包括细菌、真菌。现阶段,血流感染诊断的金标准是血培养,通过生化方法或显微镜观察确定病原体。但该方法耗时长,通常需要数天时间才能确定结果,且对于难培养或无法培养的病原体,则难以准确检测。在缺乏准确诊断结果的情况下,临床医师为了缓解病症,可能盲目使用抗生素,导致患者的生存率降低、细菌耐药性的出现以及治疗费用的增加等。

下一代测序(next-generation sequencing)的面世使得测序通量增加、成本降低,更适于临床检测。国内外已经有报道利用全基因组方法或16S rRNA测序方法直接对患者的全血样本进行病原检测。但血流感染患者中病原体含量较低,全血基因组测定时的随机扩增将产生较多宿主基因数据,造成测序数据的浪费。而16S rRNA的测序方法只能将病原体鉴定到属层级,对于一些亲缘关系较近的病原体很难鉴定到种,无法为临床治疗提供有效的依据。Ampliseq技术是在测序的文库制备过程中选择特定的引物扩增富集特定的片段,扩增的片段长度与下游的测序仪的读长相符可以直接用于测序分析。

发明内容

本发明所要解决的技术问题是如何检测引发血流感染病原体,尤其是金黄色葡萄球菌(S.aureus)、表皮葡萄球菌(S.epidermidis)、单核细胞增多性李斯特氏菌(L.monocytogenes)和肺炎克雷伯菌(K.pneumoniae)。

为解决上述技术问题,本发明首先提供了一种成套试剂,所述成套试剂由序列表中序列1-38的38条单链DNA组成。

上述成套试剂中的各单链DNA均可独立包装,各单链DNA的摩尔数可相等。

所述成套试剂的用途可为如下(b1)、(b2)、(b3)或(b4):

(b1)检测引发血流感染病原体;

(b2)制备用于检测引发血流感染病原体的试剂盒;

(b3)检测待测样本是否含有引发血流感染病原体;

(b4)制备用于检测待测样本是否含有引发血流感染病原体的试剂盒。

本发明还提供了所述成套试剂的下述任一应用:

(b1)检测引发血流感染病原体;

(b2)制备用于检测引发血流感染病原体的试剂盒;

(b3)检测待测样本是否含有引发血流感染病原体;

(b4)制备用于检测待测样本是否含有引发血流感染病原体的试剂盒。

本发明还提供了一种试剂盒,所述试剂盒包括所述成套试剂。

所述试剂盒的功能可为如下(b1)、(b2)、(b3)或(b4):

(b1)检测引发血流感染病原体;

(b2)制备用于检测引发血流感染病原体的试剂盒;

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