[发明专利]兹卡病毒疫苗组合物及其应用

说明书

本发明提供一种兹卡病毒套膜蛋白突变体及一种包含编码该突变体的核苷酸序列的核酸分子。该兹卡病毒套膜蛋白突变体较佳为在一野生型兹卡病毒套膜蛋白的第105个氨基酸位置有一苏氨酸取代，或在第248个及第250个氨基酸位置分别有一天冬酰氨酸及一苏氨酸取代，因此具有一遮蔽兹卡病毒套膜蛋白的融合环区域的N‑醣链。本发明亦提供一种疫苗组合物，其包含该兹卡病毒套膜蛋白突变体或一具有该核酸分子的重组病毒。本发明亦提供该兹卡病毒套膜蛋白突变体的用途，是用于制备预防兹卡病毒感染及降低登革病毒感染的抗体依赖性增强作用的疫苗组合物。

技术领域

本发明是关于一种重组蛋白质、核酸分子及其用途，特别是关于一种兹卡病毒套膜蛋白突变体及具有其对应核苷酸序列的核酸分子、一种包含该套膜蛋白突变体或具有该核酸分子的重组病毒的疫苗组合物、及该套膜蛋白突变体用于制备疫苗组合物的用途。

背景技术

兹卡病毒(Zika virus，ZIKV)是一种伊蚊传播的病毒，自2015年在巴西爆发感染已成为全球公共卫生的关注焦点。据2016年世界卫生组织(World Health Organization)的统计，兹卡病毒已在亚洲、北美洲、非洲、及澳洲的热带和亚热带地区的70多个国家蔓延。由于蚊子媒介的广泛传播，全世界超过250万人面临兹卡病毒感染的危险。兹卡病毒感染的症状通常是轻度的，例如发热、红疹、肌肉痛和关节痛。然而，已有报告显示兹卡病毒会引起基兰-巴瑞症候群(Guillain-Barrésyndrome，GBS)和新生儿小头畸形(neonatalmicrocephaly)等神经并发症。小头畸形的发生率在2015年的巴西大爆发后增加了20倍，因而促使世界卫生组织在2016年2月宣布国际公共卫生紧急状况。

兹卡病毒属于黄病毒科的(Flaviviridae)黄病毒属(Flavivirus)，该属尚包含其他由蚊子携带的病毒，如登革病毒(dengue virus，DENV)、黄热病病毒(yellow fevervirus，YFV)、日本脑炎病毒(Japanese encephalitis virus，JEV)、及西尼罗河病毒(WestNile virus，WNV)。兹卡病毒是一种带有套膜的RNA病毒，其直径约50nm且具有多达11kb的单股正链RNA基因体。该基因体编码一多蛋白(polyprotein)，其经转译后修饰形成十个成熟病毒蛋白，包含三个结构蛋白及七个与病毒复制有关的非结构蛋白。该三个结构蛋白分别为壳蛋白(capsid，简称C蛋白)、前膜蛋白(precursor membrane protein，简称prM蛋白)、及套膜蛋白(envelope protein，简称E蛋白)。野生型套膜蛋白在第154个氨基酸位置具有一N-糖链(N-glycan)，其会形成反向平行的同源二聚体(homodimer)以覆盖兹卡病毒的套膜表面，并且参与病毒与宿主细胞受体的结合及调控病毒套膜与细胞膜的融合。套膜蛋白在黄病毒科病毒间有高度保守性与结构相似性，并且是宿主抗体反应的主要标靶。

更具体而言，兹卡病毒套膜蛋白的胞外域(ectodomain)包含具有不同抗原性的三个区域，分别为第一区域(D I)、第二区域(D II)、及第三区域(D III)。该第二区域具有指状结构且包含一二聚体形成区域及一pH敏感性融合环(fusion loop，FL)。该融合环是一具有免疫优势(immunodominance)的高度保守胜肽，其可引发可与他类黄病毒的套膜蛋白产生交叉反应但是病毒中和能力弱的抗体。先前研究显示兹卡病毒与登革病毒的保守性抗原决定位(epitope)包含融合环及其邻近区域。