[发明专利]一种ASE法萃取大青叶中靛玉红的方法

说明书

技术领域

本发明属于靛玉红的提取领域，尤其是一种ASE法萃取大青叶中靛玉红的方法。

背景技术

《中国药典》2015年版一部制备供试品方法：取本品细粉0.25g，精密称定，置索氏提取器中，加三氯甲烷，浸泡15小时，加热回流提取至提取液无色。回收溶剂至干，残渣加甲醇使溶解并转移至100ml量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得。

本发明对技术人员的专业水平要求较高，且回流时间较长。

发明内容

针对上述不足，本发明旨在提供一种ASE法萃取大青叶中靛玉红的方法，该方法萃取时间短，重复性好。

为了实现上述技术效果，本发明提供的技术方案是这样的：、一种ASE法萃取大青叶靛玉红的方法，依次包括下述步骤：

步骤1：将大青叶样品粉碎，过三号筛，取0.25g与0.3g硅藻土混合；

步骤2：将所得的混合物装于放有滤膜的5ml ASE萃取池中，加硅藻土至与池口平行；

步骤3：用50ml乙酸乙酯萃取，结束后，用甲醇将萃取液定容至50ml。

优选地，步骤3所述的萃取步骤参数为：萃取温度为90℃，萃取时间为5min，循环次数为2次，冲洗体积为60％，吹扫时间为60。

本发明与传统方法相比，具有以下优点：

本发明考察了乙酸乙酯、正己烷、乙酸乙酯：正已烷(1:1)、甲醇，结果表示，甲醇和乙酸乙酯提取效率基本一致，但甲醇提取的杂质峰较多，故本实验采用乙酸乙酯为提取溶剂。

本发明采用3因素3水平正交试验考察了对提取效率影响较大的三个因素：萃取温度、静态萃取时间、循环次数，通过实验结果，结合极差分析，终确定较佳ASE参数为萃取温度90℃，静态萃取时间5min，循环次数2次。

附图说明

图1为以靛玉红对照品

图2为靛玉红对照品溶液的色谱图；

图3为采用ASE法萃取所得的供试品溶液的色谱图；

图4为采用药典方法提取所得的供试品溶液的色谱图。

具体实施方式

下面结合具体实施方式，对本发明的权利要求做进一步说明，但不构成对本发明的任何限制，任何在本发明权利要求保护范围内所做的有限次修改，仍在本发明的权利要求保护范围内。

实施例1

1、仪器设备及试剂

1.1仪器：

电子分析天平(XA205DU)、ASE350快速溶剂萃取仪(美国DIONEX公司)、Thermo U3000 UHPLC液相色谱仪、安捷伦超高速液相色谱仪

1.2试剂：试剂与溶液(除特别注明外，本实验所用试剂均为分析纯)

水：符合GB/T 6682规定的一级水；

甲醇(CH₄O)：色谱纯(液相色谱用)。

2、方法

2.1对照品溶液的制备：

取靛玉红对照品适量，精密称定，加甲醇制成每1ml含2μg的溶液，即得。

2.2供试品溶液的制备

2.2.1《中国药典》2015年版一部制备供试品方法：

取本品细粉0.25g，精密称定，置索氏提取器中，加三氯甲烷，浸泡15小时，加热回流提取至提取液无色。回收溶剂至干，残渣加甲醇使溶解并转移至100ml量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得。

2.2.2快速溶剂萃取法(ASE)制备供试品方法：

样品经粉碎机粉碎，过三号筛，约0.25g，精密称定，与0.3g硅藻土混合均匀，待用，移入到预先放好过滤膜的5ml萃取池中再加入适量硅藻土，轻轻振摇使之与池口在同一水平线上，拧紧萃取池上盖。萃取结束后，把萃取液转移于50ml容量瓶中，用甲醇稀释至刻度，滤过，取续滤液，即得。

2.3 ASE萃取条件：萃取溶剂为乙酸乙酯，萃取温度为90℃，萃取时间为5min，循环次数为2次，冲洗体积为60％，吹扫时间为60s。

2.4色谱条件与系统适用性试验

a)仪器：Thermo双三元液相(U-3000)、安捷伦1290超高速液相色谱仪；

b)色谱柱：Thermo Syncronis(C18 3μm 3×100mm)；

c)柱温：40℃；

d)流速：0.5mL/min；

e)流动相：：甲醇-水(75:25)；

f)检测波长：289nm；

以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；理论板数按靛玉红峰计算应不低于4000。

2.5测定法