[发明专利]用于低温保存的方法

权利要求书

1.一种用于低温保存生物样品的方法，包括使用非牛顿流体作为低温保存介质。

2.根据权利要求1所述的用于低温保存生物样品的方法，还包括通过经由机械手段、声波手段、磁场手段或电磁场手段向所述低温保存介质施加应力来调节所述低温保存介质的粘度的步骤。

3.根据权利要求1或权利要求2所述的方法，还包括施加应力以增加所述低温保存介质的粘度的步骤。

4.根据权利要求1或权利要求2所述的方法，还包括施加应力以降低所述低温保存介质的粘度的步骤。

5.根据权利要求1或权利要求2所述的方法，还包括以下步骤：施加第一应力以降低所述低温保存介质的粘度，去除所述第一应力，并且然后施加第二应力以增加所述低温保存介质的粘度。

6.根据权利要求1或权利要求2所述的方法，还包括以下步骤：施加第一应力以降低所述低温保存介质的粘度，并且然后调节所述第一应力的幅度以引起所述低温保存介质的粘度的增加。

7.根据任一前述权利要求所述的方法，包括以下步骤：施加应力以增加所述低温保存介质的粘度，并且然后保持所述应力，同时将所述样品冷却至低于所述样品的玻璃化转变温度的温度。

8.根据任一前述权利要求所述的方法，其中所述样品以50℃每分钟或更少例如10℃每分钟或更少、或1℃每分钟或更少的速率被冷却。

9.根据任一前述权利要求所述的方法，还包括以下步骤：将所冷却的样品保持在低于其玻璃化转变温度的温度，任选地保持在-80℃或低于-80℃。

10.根据任一前述权利要求所述的方法，其中所述低温保存介质是包含从2wt％至60wt％的非牛顿添加剂的水性溶液或悬浮液，所述非牛顿添加剂是具有10μm或更小的平均粒度的颗粒材料。

11.根据权利要求10所述的方法，其中用作非牛顿添加剂的所述颗粒材料选自二氧化硅(SiO₂)、玻璃、二氧化钛、碳酸钙、氧化铝、石英、铁氧化物、合成聚合物或生物衍生的聚合物例如HES、或这些材料中的两种或更多种的混合物。

12.根据任一前述权利要求所述的方法，其中所述低温保存介质包含从10wt％至40wt％的防冻剂。

13.根据权利要求12所述的方法，其中所述防冻剂选自包括以下的组：二甲基亚砜、甲酰胺、乙酰胺、C₁-C₃醇、1,2-异丙基二醇、1,2-丙二醇、乙二醇、丙二醇、甘油、葡萄糖、单糖、二糖例如蔗糖、海藻糖和乳糖、多糖例如棉子糖和右旋糖酐、聚蔗糖、聚乙二醇、聚乙烯吡咯烷酮或这些剂中的两种或更多种的组合。

14.根据权利要求10至13中任一项所述的方法，其中所述非牛顿添加剂是羟乙基淀粉(HES)。

15.根据权利要求14所述的方法，其中所述低温保存介质包含从45wt％至55wt％的HES。

16.一种用于重构低温保存的样品的方法，所述低温保存的样品例如是通过根据任一前述权利要求的方法低温保存的样品，所述方法包括以下步骤：将所述低温保存的样品加温至其玻璃化转变点，并且在低于玻璃化转变温度的温度或在玻璃化转变温度施加剪切稠化应力直到所述样品升高到高于其凝固点。

17.一种用于冷冻干燥样品的方法，包括通过根据权利要求1至15中任一项的方法低温保存样品，并且然后通过冷冻干燥从所述样品中去除水。

18.一种低温保存介质，具有非牛顿流体性质。