[发明专利]配糖体化合物的制造方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种配糖体化合物的制造方法。

背景技术

作为DNA、RNA等核酸的制造(合成)方法，举例来说，可使用亚磷酰胺(phosphoramidite)法等。利用亚磷酰胺法的核酸合成原料可使用核苷的亚磷酰胺(以下简称为“亚磷酰胺”)。前述亚磷酰胺的2’-位保护基团的实例包括多种保护基团，诸如TBDMS(叔丁基二甲基甲硅烷基[tert-butyldimethyl silyl])基团、TOM(三异丙基甲硅烷氧基甲基[triisopropylsilyloxy methyl])基团、ACE(双(2-乙酰氧基乙氧基)甲基[bis(2-acetoxy ethoxy)methyl])基团等。

然而，TOM-亚酰胺(amidite)、ACE-亚酰胺等的常规亚磷酰胺因其高制造成本而难以用作医药品等的合成原料。此外，TBDMS亚酰胺在以偶联(缩合)反应合成核酸时，会有核酸收率及纯度不高的情况。

因此，已尝试保护基团的开发，其能够提供可以低成本制造且可以高收率和高纯度制造核酸的亚磷酰胺(专利文献1和2)。

现有技术文献

专利文献

专利文献1：WO 2013/027843

专利文献2：WO 2008/090829

发明内容

发明要解决的问题

本发明的目的在于提供一种更有效且高纯度地制造优选用于核酸的制造(合成)的亚磷酰胺的方法。

用于解决问题的方案

为了解决上述问题，本发明人进行了深入研究，发现与常规方法相比，通过改变保护基团导入时的试剂的选择及其添加顺序和反应条件，以及通过研究起始原料(亚酰胺试剂)的制备方法(例如，通过研究蒸馏法(添加剂的选择)提高亚酰胺试剂的纯度)，可以更有效且高纯度地制造亚磷酰胺，从而完成本发明。

因此，本发明提供以下内容。

[1]一种通式(I)所示的配糖体化合物或其盐的制造方法，其包含使通式(103)所示的硫醚化合物与通式(105)所示的醇化合物在卤化剂、干燥剂和路易斯酸的存在下进行偶联反应，然后在选自含硫抗氧化剂和含马来酰亚胺基化合物的至少一种的添加剂的存在下进行蒸馏以得到通式(104)所示的硫醚化合物的步骤(步骤0)；和使通式(Ia)所示的配糖体化合物与通式(104)所示的硫醚化合物在卤化剂、干燥剂和路易斯酸的存在下进行偶联反应以得到通式(Ib)所示的配糖体化合物的步骤(步骤1)，

式(I)中，R¹为羟基的保护基团；R^2a和R^2b相同或不同且各自为氢原子或取代基；R^2c为氢原子、吸电子基团或任选地被吸电子基团取代的取代基；R^2a和R^2b任选地与它们所键合的氮原子形成环；B为具有核酸碱基骨架的原子团；L¹为亚烷基；D¹为吸电子基团；和m为正整数，

式(103)中，m如上定义；R和R'相同或不同且各自为烷基、烯基、炔基、芳基、芳烷基、环烷基、环烯基、环烷基烷基、环烯基烷基或烷氧基烷基，

式(105)中，各符号如上定义，

式(104)中，各符号如上定义，

式(Ia)中，B如上定义；X为下式表示的基团：

上式中，n为0或1；R^1a～R^1d相同或不同且各自为氢原子、烷基或烷氧基，

式(Ib)中，各符号如上定义。

[2]根据上述[1]所述的制造方法，其进一步包含使通式(Ib)所示的化合物脱保护以得到通式(Ic)所示的配糖体化合物的步骤(步骤2)，

式中，各符号的定义如权利要求1所述。

[3]根据上述[2]所述的制造方法，其进一步包含在通式(Ic)所示的配糖体化合物中导入羟基的保护基团以得到通式(Id)所示的配糖体化合物的步骤(步骤3)，

式中，各符号的定义如权利要求1所述。

[4]根据上述[3]所述的制造方法，其进一步包含使通式(Id)所示的配糖体化合物磷酸化以得到通式(I)所示的配糖体化合物的步骤(步骤4)。