[发明专利]用于肿瘤个体化医疗的三维细胞培养材料及其制备方法有效
| 申请号: | 201610150871.0 | 申请日: | 2016-03-16 |
| 公开(公告)号: | CN105695413B | 公开(公告)日: | 2020-03-31 |
| 发明(设计)人: | 董宇琴;杜志云;郑希;张焜 | 申请(专利权)人: | 广东工业大学 |
| 主分类号: | C12N5/09 | 分类号: | C12N5/09 |
| 代理公司: | 广州市红荔专利代理有限公司 44214 | 代理人: | 张文 |
| 地址: | 510006 广东省广*** | 国省代码: | 广东;44 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 用于 肿瘤 个体化 医疗 三维 细胞培养 材料 及其 制备 方法 | ||
1.用于肿瘤个体化医疗的三维细胞培养材料,其特征在于:所述用于肿瘤个体化医疗的三维细胞培养材料包括以下含量(w/v)的组分:Matrigel基质胶5%-25%、低粘度藻朊酸钠溶液31%-55%、中粘度藻朊酸钠溶液8%-25%和透明质酸钠溶液9%-27%,所述中粘度藻朊酸钠溶液为中藻朊酸钠为2%(w/v),所述低粘度藻朊酸钠溶液中藻朊酸钠为4%(w/v),所述透明质酸钠溶液的质量浓度为10mg/ml。
2.根据权利要求1所述的用于肿瘤个体化医疗的三维细胞培养材料,其特征在于:所述用于肿瘤个体化医疗的三维细胞培养材料中各组分的质量分数为:Matrigel基质胶15%,低粘度藻朊酸钠溶液40%,中粘度藻朊酸钠溶液10%,透明质酸钠溶液为12%。
3.根据权利要求2所述的用于肿瘤个体化医疗的三维细胞培养材料的制备方法,其特征在于包括以下步骤:
(1)制备藻朊酸钠混合液,将2%中粘度藻朊酸钠溶液和4%低粘度的藻朊酸钠溶液按一定体积比混合形成藻朊酸钠混合液;
(2)除去藻朊酸钠混合液中气泡,将步骤(1)中制得的藻朊酸钠混合液置于冰上10-20min以消除汽泡以防止包裹细胞时气泡破裂造成细胞损伤;
(3)将10mg/ml透明质酸钠溶液和经过4℃过夜溶解的Matrigel基质胶溶液按一定体积比混合,用无菌吸管上下吹打3-5次使之均匀混合,置于冰上5-10min,防止Matrigel在室温下形成凝胶;
(4)将步骤(3)制得的混合溶液与步骤(2)中的藻朊酸钠混合液混合均匀,并置于冰上10-15min,消除气泡。
4.根据权利要求3所述的用于肿瘤个体化医疗的三维细胞培养材料的制备方法,其特征在于:所述步骤(1)中2%中粘度藻朊酸钠溶液和4%低粘度的藻朊酸钠溶液的混合体积比为1:1-1:5。
5.根据权利要求3所述的用于肿瘤个体化医疗的三维细胞培养材料的制备方法,其特征在于:所述步骤(3)中10mg/ml透明质酸钠溶液和Matrigel基质胶溶液的混合体积比为1:2-1:6。
6.根据权利要求3所述的用于肿瘤个体化医疗的三维细胞培养材料的制备方法,其特征在于:还包括对所述2%藻朊酸盐溶液的配制,配制步骤为称取1g藻朊酸钠粉末边搅拌边缓慢加入50℃水浴加热的蒸馏水中,高压蒸汽加热,自然冷却至室温再用0.22μm滤器过滤。
7.根据权利要求3所述的用于肿瘤个体化医疗的三维细胞培养材料的制备方法,其特征在于:所述10mg/ml透明质酸钠溶液通过以下步骤制备,称取200mg透明质酸钠粉末加入到20ml pH值为7.4的磷酸盐缓冲液中,过夜静置后,用0.22μm滤器过滤制得。
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