[发明专利]一种纯化细菌污染丝状真菌的简易方法

说明书

本发明公开了一种纯化细菌污染丝状真菌的简易方法，包含以下操作步骤：(1)将加热融化后的培养基倒入培养皿中，厚度为1‑2mm；(2)将与细菌混合生长的目的真菌接入所得平板培养基中，培养2‑3天；(3)将长有真菌菌落的平板培养基放置在30‑35℃条件下培养5‑7天；(4)将长有真菌的培养基切割成块状，转接至新的平板培养基进行培养；(5)挑取步骤(4)培养所得菌落边缘菌丝转入新的平板培养基中培养，即可获得纯化的目的真菌。本发明方法对细菌污染丝状真菌的纯化分离方法，通过简捷的操作，不用添加额外的抗生素，不用其他装置设备辅助，即能获得较纯的真菌。纯化效果好，纯化方法易操作、耗材少，成本低。

技术领域

本发明属于生物技术领域，具体涉及一种纯化被细菌污染的丝状真菌的简易方法。

背景技术

真菌在自然界中种类繁多，很多能引起人体、牲畜和植物病害，还可引起食物的霉变。有的可用于工业生产发酵和提取分泌产物等。获得单一的目标真菌纯培养物是进行一系列科学研究与应用的基础。但由于环境中微生物种类较多，目的真菌容易受到污染，尤其是细菌的污染。目前，纯化被细菌污染的丝状真菌主要有两类方法，第一类：主要在培养基中添加抗生物的方法抑制细菌的生长；第二类：利用真菌菌丝具有穿透琼脂的能力，采用一定的设备装置去除真菌上的细菌。第一类方法主要操作流程：1)将琼脂培养基加热融化，冷却至50℃左右；2)无菌条件下添加抗生素，摇匀后倒入培养皿制成平板培养基；3)接入目的真菌；4)适温条件下培养2-4天；5)挑取菌落边缘菌丝转接到新的平板培养基上，培养2-4天；6)重复步骤5)1-2次不等。第二类方法，如申请号200910235086.5的《一种纯化被细菌污染的丝状真菌的装置和方法》，主要操作流程：1)纯化真菌收集层培养基(特殊培养基)的制作和灭菌；2)纯化装置的制作与灭菌，装置包括封口膜、纯化杯、纯化柱等等；3)将被细菌污染的真菌接入纯化装置并进行培养；4)将纯化培养层的真菌转接到培养基中，获得纯化的目的真菌。

上述方法存在对于被细菌严重污染或与细菌紧密结合生长的真菌分离效果不够好，或操作起来较为繁琐的问题。抗生素的频繁使用也容易改变目的真菌的某些理化性状，使得纯化后的真菌性状与原始的菌株不同，影响后续的研究工作。同时利用纯化设备装置较为繁琐，少量菌株的纯化尚可应付，但对于真菌的群体研究，实施起来存在困难。而用于科学研究或工业化应用的丝状真菌通常需要在实验室条件下转接培养扩繁，但在此过程中很容易受到环境中细菌的污染。因此，解决被细菌污染的真菌的问题，可大大提高科学研究以及工厂化生产的效率。

公开于该背景技术部分的信息仅仅旨在增加对本发明的总体背景的理解，而不应当被视为承认或以任何形式暗示该信息构成已为本领域一般技术人员所公知的现有技术。

发明内容

本发明的目的在于提供一种纯化细菌污染丝状真菌的简易方法，从而克服现有技术中须额外使用抗生素，从而影响所得到真菌理化性状、纯化效果差、纯化过程繁琐、耗材大的缺点。

为实现上述目的，本发明提供的技术方法如下：

一种纯化细菌污染丝状真菌的简易方法，包含以下操作步骤：

(1)制作薄层培养基平板：将加热融化后的培养基倒入培养皿中，在培养皿中形成厚度为1-2mm的平板培养基；

(2)将与细菌混合生长的目的真菌接入步骤(1)中所得平板培养基中，25-28℃温度下培养2-3天；

(3)将步骤(2)中培养2-3天后长有真菌菌落的平板培养基的培养皿转至高温环境培养5-7天；

(4)将步骤(3)中培养5-7天后长有真菌的培养基切割成块状，转接至新的平板培养基进行培养；

(5)挑取步骤(4)培养所得菌落边缘菌丝转入新的平板培养基中培养，即可获得纯化的目的真菌。

其中，所述的培养基为PDA培养基，即马铃薯葡萄糖琼脂培养基。