[发明专利]一种防治植物终极腐霉病害的木霉菌株及制剂

说明书

本发明公开了一种防治植物终极腐霉病害的木霉菌株及制剂。该木霉菌株为厚垣孢木霉（Trichoderma chlamydospora）CCTCC‑TW20622，其在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心保藏，其保藏编号是CGMCC NO.11337，保藏日期是2015年9月8日。该木霉菌株产生的纤维素酶和葡聚糖酶可消解终极腐霉的细胞壁，引起菌丝破裂；对终极腐霉有强烈的抑制作用，平板抑制率达100%。本发明制剂对由终极腐霉引起的植物病害防治效果达到90%以上。

技术领域

本发明涉及一种防治植物病害的木霉及其应用，特别是涉及一种防治植物终极腐霉病害的木霉菌株及制剂。

背景技术

终极腐霉(Pythium ultimum)属于真菌界真菌门鞭毛菌亚门藻状菌纲霜霉目腐霉科，为低等真菌，目前报道分布甚广，它不仅栖息在土壤中，还广泛侵染大豆、菜豆、豌豆、甘薯、松苗、咖啡、苹果、柑橘、桃、棉花、菊花、大丽花、南瓜、西瓜、甘蔗、苜蓿、番茄等150余种经济植物，引起苗枯，猝倒、根腐、脚腐、枯萎等多种病害。

目前常用的预防及防治该病害的方法有：农田管理改善、应用抗性品种、化学药剂防治，但效果不甚明显，且化学农药施用不当造成了一系列的环境及健康问题。随着生活水平的提高，人们对绿色食品、有机食品需求越来越大，对支撑其生产的绿色、无污染、高效生物农药的需求也日益扩大。国内外也开展了相关的研究，如李琳(2013)等分离到的棘孢木霉T31对腐霉的平板抑制率为74.39％，但没有开发出相关产品，仅有10多项相关的发明专利涉及植物提取抑菌有效成分或微生物菌株可防治腐霉猝倒病的报道。Bin Li(2007)筛选到14株类芽孢杆菌，防治黄瓜腐霉猝倒病防效达到73％；Novozymes公司利用专利菌株利迪链霉菌WYEC108研制了防治腐霉、疫霉、镰刀菌、丝核菌等病原菌的生物杀菌剂；国外还有报道利用木霉菌、荧光假单胞菌防治玉米腐霉猝倒病的成功案例。

然而，国内登记防治作物猝倒病的药剂99个，其中仅有2个产品不是化学农药，且为捷克进口产品，国内没有相关产品报道，因此研制多机制防治腐霉病害的微生物农药成为市场急需。木霉(Trichoderma spp.)具有多种生防机制：寄生、竞争、水解酶活性、抗生性代谢产物等，是重要的植物病害生物防治菌，目前已有10多个木霉产品获得农药登记并得到广泛应用，故利用木霉研发生物农药防治由终极腐霉类低等真菌引起的植物病害成为可能。

发明内容

本发明的目的就是针对上述存在的缺陷而提供一种防治植物终极腐霉病害的木霉菌株及制剂。该木霉产生的纤维素酶和葡聚糖酶可消解终极腐霉的细胞壁，引起菌丝破裂；对终极腐霉有强烈的抑制作用，平板抑制率达100％。本发明制剂对由终极腐霉引起的植物病害防治效果达到90％以上。

本发明一种防治植物终极腐霉病害的木霉菌株及制剂的技术方案为，该木霉Trichoderma chlamydospora CCTCC-TW20622在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心保藏，地址：北京市朝阳区北辰西路1号院3号，邮编：100101，其保藏编号是：CGMCCNO.11337，菌种的拉丁文名称是Trichoderma chlamydospora，参据的微生物(株)：CCTCC-TW20622，保藏日期是2015年9月8日。

该木霉CCTCC-TW20622在PDA平板上对终极腐霉抑制率高达100％，其产生的纤维素酶和葡聚糖酶可消解终极腐霉的细胞壁，引起菌丝破裂；CCTCC-TW20622在PDA平板上产生分生孢子能力较弱，而产生厚垣孢子的能力较强，4d后可产生大量的厚垣孢子；液体发酵厚垣孢子产量为5亿/mL。

该木霉ITS扩增引物：ITS1-F：5’-CTTGGTCATTTAGAGGAAGTAA-3’，ITS4：5’-TCCTCCGCTTATTGATATGC-3’，菌株CCTCC-TW20622的ITS序列全长为613bp，如下所示：