[发明专利]一种红菇凝集素的制备方法及应用

权利要求书

1.一种红菇提取物的制备方法，其特征在于由以下步骤制备：

（1）提取物粗品的提取：红菇子实体称重、粉碎、加入少量的磷酸盐缓冲液，于高速组织捣碎机中捣碎，然后加入适量的磷酸盐缓冲液，于2～6℃中浸提24～48h，四层纱布过滤，滤液经8000～12000r/min于4℃下离心20～40min，弃沉淀，收集上清液，加入固体硫酸铵至75%～80%饱和度，4℃下静置12～24h，于4℃下以8000～12000r/min速度离心30～60min，收集沉淀物，加入少量的磷酸盐缓冲液溶解沉淀，透析除盐，检测凝血活性，冷冻干燥，得到红菇提取物粗制品；

（2）DEAE离子交换层析：取步骤（1）所得的红菇提取物粗制品，用磷酸盐缓冲液重新溶解，上样于DEAE-纤维柱，上样前柱材料先用磷酸盐缓冲液平衡三个柱体积，然后以含有0.6mol/L NaCl的pH值为7.2的磷酸缓冲液以流速为30ml/h速度洗脱，将活力峰部分收集，透析除盐，冷冻干燥；

（3）SephadexG-100凝胶层析：用蒸馏水平衡柱子，洗脱液为pH值为7.2的0.15mol/L的磷酸缓冲液，流速为40ml/h，3ml/管，将活力峰部分收集，透析，冷冻干燥得到红菇提取物，所述红菇提取物具有抑菌活性。

2.根据权利要求1所述的一种红菇提取物的制备方法，其特征在于步骤（1）、（2）所述的磷酸盐缓冲液指的是pH值为7.2的内含0.15mol/L NaCl的0.015mol/L的磷酸缓冲液。

3.根据权利要求1所述的一种红菇提取物的制备方法，其特征在于步骤（1）中浸提时的液料比为10:1。

4.根据权利要求1所述的一种红菇提取物的制备方法，其特征在于步骤（2）洗脱峰共有4个，其中活力峰指的是第4个洗脱峰。

5.根据权利要求1所述的一种红菇提取物的制备方法，其特征在于步骤（3）中将收集到的活力峰经过SephadexG-100分子筛层析后得到3个蛋白峰，其中活力峰指的是第2个蛋白峰。