[发明专利]一种基于同种属来源第一抗体的免疫荧光双重标记方法

权利要求书

1.一种基于同种属来源第一抗体的免疫荧光双重标记方法，其特征在于：用两种同一种属来源的抗A蛋白抗体和抗B蛋白抗体对待检测标本中的A蛋白和B蛋白进行免疫荧光双重标记。

2. 根据权利要求1所述的一种免疫荧光双重标记方法，其特征在于：利用SABC免疫荧光法和间接免疫荧光法，在抗A蛋白抗体和抗B蛋白抗体为同一种属来源时对细胞或组织的A蛋白或B蛋白进行双重标记检测。

3. 根据权利要求1所述的免疫荧光双重标记方法，其特征在于包括以下步骤：

（1）确定抗A蛋白抗体最小工作浓度；

（2）SABC法检测A蛋白；

（3）间接法检测B蛋白；

（4）荧光图片叠加分析。

4.根据权利要求3所述的免疫荧光双重标记方法，其特征在于包括以下步骤：

（1）确定抗A蛋白抗体最小工作浓度

（a）制备待测组织切片或细胞爬片； 

（b）血清封闭；

（c）孵育二倍梯度稀释抗A蛋白抗体；

（d）孵育针对抗A蛋白抗体种属来源的荧光素标记第二抗体；

（e）荧光显微镜镜检，分析染色情况，找出抗A蛋白抗体刚好不能检测出待测A蛋白的最小工作浓度；

（2）SABC法检测A蛋白

（a）按照步骤（1）准备组织切片或细胞爬片； 

（b）血清封闭；

（c）使用步骤（1）得到最小工作浓度孵育抗A蛋白抗体；

（d）孵育针对抗体A种属来源的生物素标记的第二抗体；

（e）孵育荧光素标记的链霉亲和素； 

（f）荧光显微镜镜检，观察染色情况；

（3）间接法检测B蛋白

（a）利用步骤（2）已显色的组织切片或细胞爬片，孵育抗B蛋白抗体；

（b）孵育荧光素标记第二抗体；

（c）荧光显微镜镜检，分析染色情况； 

（4）荧光图片叠加分析

（a）荧光显微镜镜检、拍照，获取待测A和B蛋白的镜检照片；

（b）利用软件对照片进行叠加，分析两种蛋白的表达情况。