[发明专利]一种从牡丹雄蕊中提取分离芍药苷类化合物的方法

说明书

技术领域

本发明涉及植物中生物活性物质的提取分离方法，具体是指从牡丹雄蕊中提取分离芍药苷类化合物的方法。 

背景技术

牡丹（学名：Paeonia suffruticosa Andr）：毛莨科，芍药属，为多年生落叶灌木，花色有红、粉、黄、白、绿、紫等；花蕊以雄蕊居多。牡丹原产于中国西部秦岭和大巴山一带，除了作为观赏植物外，还可用于生产丹皮入药，具有改善心血管疾病、镇静、消炎和提高机体免疫力等药效。 

有文献报道从芍药属植物的根等部位可分离得到系列芍药苷类化合物，此类化合物具有抗凝血、神经肌肉阻滞、提高认知功能、止痛、抗炎、抗高血压、降血脂及抗血栓等多种生物活性。民间因牡丹雄蕊茶具有降低血脂、预防和辅助治疗心脑血管疾病等功效而备受人们关注，同时因其对胃肠功能紊乱、便秘有积极的辅助治疗作用，对前列腺炎、前列腺肥大有辅助治疗和恢复作用，被誉为“植物黄金”。 但目前国内外对牡丹雄蕊中次级代谢产物的提取分离及药理作用研究未见文献及专利报道。因此，从牡丹雄蕊中提取分离芍药苷类化合物等生物活性物质，可以提升牡丹的应用价值和经济价值，对牡丹的综合利用具有重要意义。 

发明内容

本发明要解决的技术问题是提供一种从牡丹雄蕊中提取分离芍药苷类化合物的方法。该方法采用硅胶柱层析、凝胶柱层析及高效液相制备技术，提取分离出系列芍药苷类化合物。该方法操作简便可控，获得的系列芍药苷类化合物杂质少，纯度高，可广泛应用于药品、保健品等行业，具有较高的经济价值。 

本发明所述的从牡丹雄蕊中提取分离芍药苷类化合物的方法，包括以下步骤： 

1) 牡丹雄蕊干燥、粉碎，先用甲醇超声浸提三次，过滤收集滤液，减压蒸馏浓缩至干得浸膏；溶剂回收，循环使用。雄蕊滤渣再用二氯甲烷/甲醇（体积比1︰1）超声浸提三次，过滤收集滤液，减压蒸馏浓缩至干得浸膏；溶剂回收，循环使用。两次所得浸膏合并得总浸膏。

2)对总浸膏经硅胶柱层析，分离得到多个组分。 

3) 对其中部分组分分别进行硅胶柱层析，再进行sephadex LH-20 凝胶柱层析，然后用制备型HPLC进行分离，可以得到系列芍药苷类化合物 (结构见附图)。溶剂回收，循环使用。 

以上步骤1)中使用甲醇浸提时，料液比为1︰1～3(W/V)，超声处理时间为30～60分钟；使用二氯甲烷/甲醇（体积比1︰1）浸提时，料液比为1︰1～3(W/V)，超声处理时间为30～60分钟。 

以上步骤2)中，使用的硅胶为100～300目，洗脱剂为石油醚/乙酸乙酯(0～100％，V/V)或二氯甲烷/甲醇（30～100％，V/V) ，梯度洗脱。溶剂回收，循环使用。 

以上步骤3)中，硅胶柱层析时使用的硅胶为100～300目，洗脱剂为石油醚/乙酸乙酯(0～100％，V/V)或二氯甲烷/甲醇（30～100％，V/V) ，等度或梯度洗脱。凝胶柱层析时用石油醚/二氯甲烷/甲醇(1︰1︰1，V/V/V) 或者二氯甲烷/甲醇 (1︰1，V/V) 作洗脱剂洗脱。用制备型HPLC进行分离时，使用C-18柱，甲醇/水(0～100％，V/V) 作洗脱剂，等度或梯度洗脱。以上溶剂均分别回收，循环使用。 

本发明提供了一种从牡丹雄蕊中提取分离芍药苷类化合物的方法。该方法利用超声辅助溶剂提取，硅胶柱层析、凝胶柱层析和制备型HPLC等层析技术从牡丹雄蕊中提取分离芍药苷类化合物。该方法操作简便可控，获得的系列芍药苷类化合物杂质少，纯度高，可广泛应用于药品、保健品等行业，具有较高的经济价值。 

附图说明

牡丹雄蕊中芍药苷类化合物类化合物结构图 

具体实施方式

实施例1 

1) 牡丹雄蕊干燥、粉碎，先用甲醇超声浸提三次，过滤收集滤液，减压蒸馏浓缩至干得浸膏；溶剂回收，循环使用。雄蕊滤渣再用二氯甲烷/甲醇（体积比1︰1）超声浸提三次，过滤收集滤液，减压蒸馏浓缩至干得浸膏；溶剂回收，循环使用。两次所得浸膏合并得总浸膏。

2) 总浸膏经硅胶柱层析，使用的硅胶为100～200目，洗脱剂为石油醚/乙酸乙酯(0～100％，V/V)或二氯甲烷/甲醇（30～100％，V/V) ，梯度洗脱，分离得到多个组分(Fr.1～Fr.11)。溶剂回收循环使用。