[发明专利]一种高频诱导大豆丛生芽的高效转基因方法

权利要求书

1.一种高频诱导大豆丛生芽的高效转基因方法，包括以下步骤：

1)将无菌培养的大豆幼苗沿着下胚轴与子叶的生长点，去掉下胚轴和部分初生叶，保留初生叶基部，制备外植体；

2)将外植体放入离心管中，加入含待转化目的基因的农杆菌液至50ml，20-200目的分析纯石英砂2.0-2.3g，在漩涡震荡仪中，2000-3000rpm漩涡震荡混合5-10分钟后，吸干多余菌液，接种于固体共培养培养基中；

3)外植体转移到SIM培养基中诱导抗性丛生芽和/或MBT组织再生；

4)按常规方法继续培养。

2.根据权利要求1所述的一种高频诱导大豆丛生芽的高效转基因方法，其特征在于：所述的外植体，是将无菌苗沿着下胚轴与子叶的生长点分生组织去掉两片子叶、初生叶以及多余的下胚轴，制备外植体。

3.根据权利要求1或2所述的一种高频诱导大豆丛生芽的高效转基因方法，其特征在于：所述的农杆菌为根癌农杆菌EHA105或根癌农杆菌AGL1。

4.根据权利要求3所述的一种高频诱导大豆丛生芽的高效转基因方法，其特征在于：优选为加石英砂2.3克，3000rpm漩涡震荡混合10分钟，25℃黑暗培养24小时。