[发明专利]一种完整肽聚糖磁性脂质体的制备方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种磁性脂质体的制备方法。

背景技术

近年来，由于微生态学的崛起和医学的快速发展，双歧杆菌的很多重要作用被越来越多的学者重视和研究起来。其中最引人注意的是双歧杆菌的抗肿瘤作用，普遍认为其抗肿瘤机理是它可以激活吞噬细胞，提高体细胞免疫功能，抑制肿瘤细胞的产生或分化。研究显示，双歧杆菌细胞壁制备完整肽聚糖可以导致肿瘤细胞的破坏，此后越来越多的研究显示，肽聚糖发挥着多种的生物学活性，是双歧杆菌众多益生作用(免疫调节、抗感染、抗肿瘤活性)的效应物质。

完整肽聚糖易被消化酶分解进而活性降低甚至消失，因此采用脂质体进行保护，但是以这种形式给药存在药物剂量大及对正常组织有损害的问题；文章“双歧杆菌肽聚糖的提取及其白蛋白磁性微球的制备”中所得白蛋白微球在扫描电镜下观察到微球的直径在6μm左右，微球经过激光粒径分布测量仪测得的平均粒径为5.32μm，可见磁性微球粒径大，导致静脉注射易堵塞血管，口服不易吸收的问题。

发明内容

本发明目的是为了解决现有磁性微球制备技术制备出的磁性微球粒径大，静脉注射易堵塞血管，口服不易吸收的问题，而提供一种完整肽聚糖磁性脂质体的制备方法。

完整肽聚糖磁性脂质体的制备方法按以下步骤实现：一、取0.22～0.26g的蛋黄磷脂酰胆碱和0.05～0.07g的胆固醇并用18～22ml的氯仿溶解，得混合液；二、将混合液倒入圆底烧瓶，然后置于50～60℃的水浴中，在真空度为-0.08～0.1MPa的条件下旋转蒸发至圆底烧瓶内形成脂质薄膜，再加入0.18～0.22ml的磁性纳米颗粒悬液、0.004～0.006g的完整肽聚糖和48～52ml的磷酸盐缓冲液，在60℃的条件下水化3h，即完成完整肽聚糖磁性脂质体的制备；其中磁性纳米颗粒悬液的浓度为26～28mg/ml。

本发明中应用磁性脂质体作为完整肽聚糖的载体，可以使抗肿瘤药物肽聚糖具有控释性和靶向性的重要功能，这些功能使药物可以更好的发挥治疗作用可防止药物在胃酸条件下分解，减少药物与胃蛋白酶等消化酶的接触，从而提高药物在胃肠中的稳定性，磁性的载体粒径小又具有粘附性，使被包封的药物可以完好的输送至不同的组织和细胞，有利于局部用药时增加其滞留性，有利于增加药物与肠壁的接触面积，延长接触时间，提高药物的生物利用率，达到部位特异性和靶向给药的目的；同时由于对磁场有较好的响应，磁性脂质体可以应用于药物靶向治疗，利用体外磁场效应引导脂质体选择性的到达并定位于肿瘤靶区，可以降低用药剂量和对正常组织的损害。

本发明中采用薄膜法制备完整肽聚糖磁性脂质体，把完整肽聚糖和磁性纳米颗粒包埋在脂质体中，形成了完整肽聚糖磁性脂质体体系，降低了对外界环境对完整肽聚糖的影响，使完整肽聚糖更加稳定，这是肽聚糖发挥其生物学效应的基础，同时使整个体系具有良好的磁响应性；完整肽聚糖磁性脂质体的包埋率为64.6～65.5%。

本发明中所得完整肽聚糖磁性脂质体的磁性微球粒径为180～200nm，在获得靶向性的同时更加有利于人体吸收；同时静脉注射不易堵塞血管，口服易吸收，且实现了在有效保护肽聚糖结构完整的同时使其具有磁靶向性这一技术难题，并且制备工艺简单，具有广泛的应用前景。

附图说明

图1为具体实施方式十六中所得完整肽聚糖磁性脂质体的透射电镜图。

具体实施方式

本发明技术方案不局限于以下所列举具体实施方式，还包括各具体实施方式间的任意组合。

具体实施方式一：本实施方式完整肽聚糖磁性脂质体的制备方法按以下步骤实现：一、取0.22～0.26g的蛋黄磷脂酰胆碱和0.05～0.07g的胆固醇并用18～22ml的氯仿溶解，得混合液；二、将混合液倒入圆底烧瓶，然后置于50～60℃的水浴中，在真空度为-0.08～0.1MPa的条件下旋转蒸发至圆底烧瓶内形成脂质薄膜，再加入0.18～0.22ml的磁性纳米颗粒悬液、0.004～0.006g的完整肽聚糖和48～52ml的磷酸盐缓冲液，在60℃的条件下水化3h，即完成完整肽聚糖磁性脂质体的制备；其中磁性纳米颗粒悬液的浓度为26～28mg/ml。

具体实施方式二：本实施方式与具体实施方式一不同的是步骤一中取0.22g的蛋黄磷脂酰胆碱和0.07g的胆固醇并用18ml的氯仿溶解，得混合液。其它步骤及参数与具体实施方式一相同。

具体实施方式三：本实施方式与具体实施方式一不同的是步骤一中取0.26g的蛋黄磷脂酰胆碱和0.05g的胆固醇并用22ml的氯仿溶解，得混合液。其它步骤及参数与具体实施方式一相同。