[发明专利]采用大孔吸附树脂制备银杏酸的方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种天然产物的分离纯化方法，更具体涉及一种采用大孔吸附树脂制备天然 产物银杏酸的方法。

背景技术

银杏是中国特有的珍稀名贵树种，素有“植物界的活化石”之称，列为国家二级保护植 物，入选中国卫生部首批药食同源中药材名录，中国的银杏资源占世界总量的70％。

银杏果和银杏叶均有很高的药用价值和食用价值，现代药理研究表明，其活性成份主要 有黄酮、内酯、银杏酸及聚戊烯醇等4种，黄酮和内酯对心脑血管疾病、老年性外周循环障 碍、老年痴呆症有很好的疗效，银杏酸和聚戊烯醇具有明显的抗肿瘤、抗氧化、抗菌、抗病 毒和抗炎活性。

目前，国际上对银杏叶的黄酮和内酯成分的研究比较成熟，仅中国就可年产银杏叶提取 物浸膏200吨，但对银杏酸和聚戊烯醇的研究较少，尤其是从银杏叶、银杏果和银杏外种皮 中制备银杏酸的工作才刚刚起步。银杏酸广泛存在于银杏叶(占干重的1～2％)、银杏果和银 杏外种皮(占干重的3～5％)中，尤其以银杏外种皮中含量最高。

由于银杏酸具有免疫毒性、胚胎毒性和细胞毒性等毒副作用，会引起漆毒样皮炎等致敏 反应，因此，银杏酸含量被作为国内外银杏叶提取物制剂的监控指标，其含量被严格限定在 5ppm以下。但是，目前国内生产的银杏叶提取物制剂的银杏酸含量常常超标，甚至高达2000 ppm以上(专利申请200710049086.7)，严重制约了银杏叶提取物制剂的安全使用和正常出口， 因此研究脱除银杏叶提取物中的银杏酸十分迫切。

专利申请(02113529.0和200710049086.7)涉及了树脂法脱除银杏叶提取物中银杏酸的 工艺，采用比较简单易行的方法将银杏酸从银杏叶提取物中分离出去，从而保证了银杏叶提 取物的质量，但并未涉及树脂富集纯化银杏酸的具体方法和详细工艺。

专利申请(02113531.2、01133794.X、03131915.7和200610093940.5)均涉及了有机溶 剂萃取法脱除银杏叶提取物中银杏酸的工艺，能够获得银杏酸小于5ppm的银杏叶提取物， 但并未涉及有机溶剂萃取银杏酸的具体方法和详细工艺，还存在着有机溶剂的渗透性不强、 溶剂损耗大和毒性大、制备成本高的缺点。

由于银杏酸具有强烈的杀虫、抑菌、抗肿瘤、抗病毒、消炎和清除自由基等活性，甚至 有报道认为银杏树无虫害状况归功于银杏酸的作用，因此，银杏酸可望进一步开发成植物源 农药和创新天然药物(专利申请200610085571.5、200610027601.7和ZL 200610024040.5)。 但是，中国国内现况是：在银杏主产地，每年有约2万吨的银杏果外种皮干皮未被利用，它 们含有大量的银杏酚酸类物质，有可能转化为优质的植物源生物农药，如果遗弃在外，不仅 会浪费资源、污染环境，甚至会引起人畜中毒。如果能够与银杏叶提取物的生产过程或银杏 果加工过程的去除银杏酸工序结合起来，将生产过程中含银杏酸的废料作为提取银杏酸的原 料，不仅可以解决银杏加工产业的污染问题，也将为这些废料提供良好的应用前景[臧丽等， 银杏酚酸的研究概况，中国医药工业杂志，2000，31(7)：45-48]。

目前，常用的银杏酸提制方法主要有：有机溶剂萃取、超临界二氧化碳萃取[沈刚等，超 临界流体萃取和高效液相色谱法测定银杏酸，分析化学，2000，28(8)：985-988]、硅胶柱 层析纯化、制备色谱多次分离、大孔吸附树脂富集等。

吴向阳等以银杏外种皮为原料，经石油醚回流提取制得粗提物，经硅胶柱层析纯化、HPLC 制备色谱多次分离后得到6种银杏酸单体[吴向阳等，银杏酸单体制备及其抗菌活性，林产 化学与工业，2003，23(4)：17-21]。张小利等采用石油醚超声萃取和硅胶柱层析法从银杏 外种皮中分离制备银杏酸，进而用于HPLC分析[张小利等，银杏酸的分离制备及HPLC分析。中 药材，2003，28(3)：557-559]。但是，这种采用亲脂性有机溶剂萃取、硅胶柱层析纯化或 HPLC制备色谱多次分离等方法制备银杏酸的工艺，存在着亲脂性溶剂的渗透性不强、溶剂和 硅胶耗量大、溶剂毒性大、制备成本高、设备投资大、工业化安全生产不易实施的缺点。