[发明专利]导致免疫球蛋白生产改善的重链突变体

权利要求书

1.核酸，其编码IgA或IgG类免疫球蛋白C_H3-结 构域的C-末端部分氨基酸序列、或编码IgE或IgM类免 疫球蛋白C_H4-结构域的C-末端部分氨基酸序列，该核酸 特征在于包含在C_H3-或C_H4-结构域的C-末端部分的所 述氨基酸序列中的甘氨酸-赖氨酸二肽，由核酸ggaaaa、 或核酸ggcaaa、或核酸gggaaa、或核酸ggaaag、或核酸 ggcaag、或核酸gggaag编码，其中所述C-末端部分氨基 酸序列为C-末端的20个氨基酸。

2.根据权利要求1所述的核酸，其特征在于所述核 酸编码氨基酸序列，其选自于SEQ ID NO：1、3、4、5、 6、7、或8的氨基酸序列。

3.根据权利要求1至2任一项所述的核酸，其特征 在于编码所述甘氨酸-赖氨酸二肽的核酸前面是核苷酸g 或a。

4.根据权利要求1至2任一项所述的核酸，其特征 在于所述甘氨酸-赖氨酸二肽是由核酸ggaaaa、或核酸 ggcaaa、或核酸gggaaa编码。

5.根据权利要求1所述的核酸，其特征在于所述 C-末端部分包括免疫球蛋白重链初级氨基酸序列的至少 20个C-末端氨基酸。

6.根据权利要求1所述的核酸，其特征在于所述核 酸编码IgA、IgE、IgM或IgG类免疫球蛋白重链C-末端 恒定区的一部分，并选自于SEQ ID NO：17、18、19、 20、21、22、23、30、或31的核酸。

7.根据权利要求6所述的核酸，其特征在于所述核 酸选自于SEQ ID NO：17、18、19、22、23、30、或31 的核酸。

8.根据权利要求7所述的核酸，其特征在于所述核 酸选自于SEQ ID NO：17、18、19、22、或23的核酸。

9.根据权利要求1至2任一项所述的核酸，其特征 在于所述核酸编码IgG1或IgG4类人免疫球蛋白重链C- 末端恒定区的一部分。

10.包含根据权利要求1所述核酸的质粒。

11.包含根据权利要求1所述核酸的细胞。

12.根据权利要求11所述的细胞，其特征在于所述 细胞是哺乳动物细胞。

13.根据权利要求12所述的细胞，其特征在于所述 哺乳动物细胞选自于CHO细胞、HEK细胞或BHK细胞。

14.由SEQ ID NO：17、18、19、22、23、30、或31 的核苷酸序列组成的核酸。

15.根据权利要求14所述的核酸，其由SEQ ID NO： 17、18、19、22、或23的核苷酸序列组成。

16.在哺乳动物细胞中生产免疫球蛋白的方法，包括 下列步骤：

a)用编码免疫球蛋白重链的核酸转染所述哺乳动物 细胞，其中SEQ ID NO：17、18、19、20、21、22、23、 30、或31的核酸编码免疫球蛋白重链的C-末端部分，

b)在适合免疫球蛋白表达的条件下培养转染的哺乳 动物细胞，

c)从培养物或细胞回收免疫球蛋白。

17.根据权利要求16所述的方法，其特征在于所述 哺乳动物细胞用一种核酸转染，该核酸包含编码免疫球 蛋白重链的表达盒和编码免疫球蛋白轻链的表达盒。

18.根据权利要求16所述的方法，其特征在于用两 种核酸转染所述哺乳动物细胞，其中第一种核酸包含编 码免疫球蛋白轻链的表达盒，第二种核酸包括编码免疫 球蛋白重链的表达盒。