[发明专利]可高产中性蛋白酶的米曲霉菌株及其在固态基质上的发酵方法

权利要求书

1.一种可高产中性蛋白酶的米曲霉菌株(Aspergillus oryza)ZW-06，CGMCCNo.1754。

2.权利要求1所述米曲霉菌株在固态基质上的发酵方法，包括以下步骤：

A.将米曲霉菌株(Aspergillus oryza)ZW-06，CGMCC No.1754接种在斜面培养基上在28-30℃下恒温培养72-96h，成熟，备用；使用时先取出放置室温活化后，用无菌水制成孢子悬浮液，待用；

B.将产酶种子培养基按1-10％(W/W)量接入斜面菌种的孢子悬浮液，接种的固体种子培养基于28-30℃下恒温培养48-72h；菌株成熟后，制取产酶菌种孢子悬浮液，待用；

C.将产酶发酵培养基按1-5％(W/W)接种量接入产酶种孢子悬浮液，充分搅拌混匀后，于30℃培养40-56h；发酵培养过程中，于培养10h起，每隔10h振荡翻曲一次，连续3-4次后静止培养，直至发酵结束；

D、酶曲的后处理：发酵结束后的产物，置35-40℃，烘干，粉碎后筛得酶干曲；

所述的产酶种子培养基为：麸皮80～120份，豆粕粉5～15份，(NH₄)₂SO₄0.5～1.2份，加水使培养基含水率达55％-60％；

所述的产酶发酵培养基为：麸皮70～88份，豆粕粉10～30份，(NH₄)₂SO₄1.2～3份，产酶诱导剂1～3份，加水使培养基含水率达55％-60％。

3.根据权利要求2所述的米曲霉菌株在固态基质上的发酵方法，其特征在于所述的斜面培养基为经过如下处理后的马铃茹葡萄糖琼脂：去皮马铃茹200份，切成小块后加水800～1200份，煮沸，将其过滤后，滤液中加入葡萄糖10～30份，并补充因蒸发而失去的水分至80～120份，加入琼脂10～30份，自然pH，0.075Mpa下灭菌。