[发明专利]获取生物肥料中胶冻样芽孢杆菌工程菌株的生产工艺

权利要求书

1.一种获取生物肥料中胶冻样芽孢杆菌工程菌株的生产工艺，包括以下工序：斜面菌种→孢子悬液→到平板→挑取有典型特征的菌落→斜面→复筛→传代实验→一级扩大培养→二级扩大培养→种子培养→发酵培养→吸附→成品，

其特征在于，所述孢子悬液经诱变处理。

2.根据权利要求1所述的生产工艺，其中所述诱变处理包括硫酸二甲酯处理和紫外线诱变处理。

3.根据权利要求2所述的生产工艺，其中所述硫酸二甲酯处理包括以下步骤：

(1)将硫酸二甲酯用无水乙醇配制成0.5～0.7％(V/V)的溶液；

(2)将孢子悬液和硫酸二甲酯溶液与磷酸盐缓冲液混合，震荡80～100分钟；

(3)移取菌液到NaS2O3溶液和磷酸盐缓冲液中，终止化学诱变作用。

4.根据权利要求3所述的生产工艺，其中步骤(2)中所述震荡采用32℃往复式恒温摇床。

5.根据权利要求3所述的生产工艺，其中步骤(2)和(3)中所述磷酸盐缓冲液的浓度为0.1mol/L，pH为7.0。

6.根据权利要求3所述的生产工艺，其中步骤(3)中所述NaS₂O₃溶液的浓度为20～30％。

7.根据权利要求2所述的生产工艺，其中所述紫外线诱变处理包括以下步骤：

(1)移取经硫酸二甲酯处理的菌液于培养皿中；

(2)在紫外灯下32～35cm处照射3～5分钟。

8.根据权利要求7所述的生产工艺，其中步骤(2)中所述紫外灯的功率为20～30W。