[发明专利]基于患者MGMT水平来治疗癌症的替莫唑胺的改进给药方案

说明书

发明技术领域

本发明描述了新颖的方法和试剂盒，所述方法和试剂盒用于治疗患增生性疾病的患者，所述增生性疾病如癌症、肿瘤或转移性疾病。

发明背景技术

本文对参考文献的讨论或引用不应解释为承认这样的参考文献是本发明的先有技术。

文献Stupp等，J.Clin.Onc.，20(5)：1375-1382(2002)中报道，脑肿瘤占所有恶性疾病的约2％。但是，据称在美国每年有超过17000个脑肿瘤病例被诊断出来，有大约13000例相关的死亡，脑肿瘤的发病率为十万分之五。Stupp等报道，成人中最常见的组织类型是3级间变性星形细胞瘤和4级多形性成胶质细胞瘤(“GBM”)。根据Stupp等的报道，恶性神经胶质瘤的标准处理方法包括通过外科切除术减少细胞，在可行的情况下再进行放射治疗(RT)，放射治疗可以联合或不联合辅助的化学治疗。但是Stupp等报道，尽管有这样的多学科综合方法，GBM患者的预后仍然很差。据报道，GBM的中值存活率一般在9到12个月，2年的存活率仅为8％到12％。

亚硝基脲是用于治疗恶性脑肿瘤的主要的化学治疗药物。但是，它们仅显示出中度的抗肿瘤活性。尽管美国经常在处方中使用，但用单一药物卡莫司汀(BCNU)或洛莫司汀进行辅助的化学治疗，或者用丙卡巴肼、洛莫司汀和长春新碱联合给药进行辅助的化学治疗，其优点都从未得以确切的证明。

化学治疗的效果，即化学治疗在不产生致命的宿主毒性的情况下消灭肿瘤细胞的能力，这依赖于药物的选择性。一类抗癌药物烷基化剂与DNA结合，从结构上破坏DNA螺旋结构，阻止DNA转录和翻译，从而导致细胞死亡。正常细胞中，烷基化剂的破坏作用可被细胞DNA修复酶，特别是O⁶-甲基鸟嘌呤-DNA甲基转移酶(MGMT)所修复，该酶也称作O⁶-烷基鸟嘌呤-DNA-烷基转移酶(AGAT)。肿瘤细胞中MGMT的水平不同，即使相同类型的肿瘤中也有不同。编码MGMT的基因通常不会变异或删除。相反，肿瘤细胞中MGMT的水平低是由于表遗传修饰造成的；MGMT启动区被甲基化，从而抑制了MGMT基因的转录，并阻止MGMT的表达。

几条证据已经表明，甲基化在基因表达、细胞分化、肿瘤发生、X-染色体失活、基因组印迹和其它主要的生物学过程中起一定作用。真核细胞中，直接位于鸟苷5′端的胞嘧啶残基的甲基化主要发生于胞嘧啶-鸟嘌呤(CG)贫乏区。相反，CpG岛在正常细胞中仍未甲基化，除了在X-染色体失活和亲本特异性印记期间，此处5′调节区的甲基化可导致转录阻遏。肿瘤抑制基因的表达也可被正常未甲基化CpG从头的DNA甲基化取消。

编码DNA修复酶的基因过度甲基化可作为预测某些癌症治疗的临床反应的标记。某些化学治疗药物(包括例如烷基化剂)通过与DNA交联抑制细胞增生，导致细胞死亡。用这样的药物进行治疗的努力会受到阻碍，并且由于DNA修复酶除去交联结构而导致对该药物的耐药性产生。考虑到多数化疗药物的有害副作用，以及用于各种治疗的某些药物的无效性，理想的是，对于化疗药物治疗的临床反应进行预测。

美国专利6,773,897号公开了涉及细胞增生性疾病化学治疗的方法。特别是提供了“预测对于某些类型化疗药物的临床反应”的方法，所述药物包括特定的烷基化剂。该方法必须确定和比较需要治疗的患者与不需要治疗的患者编码DNA修复酶的核酸的甲基化状态。任何差异都被视作临床反应的“预示”。但是，对于“预示”结果不好的任何患者，如何改善临床效果，该方法没有提供任何建议。

替莫唑胺是可购自Schering Corp.的烷基化剂，在美国的商品名为Temodar，在欧洲的商品名为Temodal。口服的Temodar胶囊含有替莫唑胺，替莫唑胺是咪唑并四嗪衍生物。替莫唑胺的化学名是3，4-二氢-3-甲基-4-氧代咪唑并[5，1-d]-不对称四嗪-8-羧酰胺(见美国专利5,260,291号)。认为替莫唑胺或其代谢物MTIC的细胞毒性主要是由于DNA的烷基化产生的。烷基化(甲基化)主要发生在鸟嘌呤的O⁶位和N⁷位。

Temodar(替莫唑胺)胶囊目前在美国被用于治疗新诊断为患有多形性成胶质细胞瘤以及难治愈的间变性星形细胞瘤的成年患者，即使用包含亚硝基脲和丙卡巴肼的给药方案后经历了疾病的发展，首次复发的患者。Temodal目前在欧洲被批准用于治疗患有例如多形性成胶质细胞瘤或间变性星形细胞瘤等恶性神经胶质瘤，并在标准治疗后复发或发展的患者。